申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過(guò)濾(0.2μm濾膜)后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.
1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!
1.對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無(wú)蛋白培養(yǎng)基則需測(cè)試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。?如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!?哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價(jià)比較高?
PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來(lái),經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內(nèi)人士評(píng)審的公開(kāi)研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強(qiáng)。PEIMAX是一種非GMP等級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無(wú)菌試劑,采用0.1μmPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn)。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請(qǐng)PEI試用裝,請(qǐng)關(guān)注我們的公眾號(hào):Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請(qǐng)”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個(gè)品牌?天津高實(shí)用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝
MAXgene GMP是一種cGMP級(jí)PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定檢測(cè)時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!近期還可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
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云南礦井有線調(diào)度通訊系統(tǒng)價(jià)格行情
新款多媒體融合調(diào)度系統(tǒng),19寸6U標(biāo)準(zhǔn)機(jī)箱結(jié)構(gòu),Z多可支持56個(gè)E1,支持16路擴(kuò)展至1792路(IPS/IPO/FXS/FXO等多業(yè)務(wù)板的總和)。模塊化設(shè)計(jì)可根據(jù)客戶需求靈活配置整機(jī)容量,所有板卡均 。
數(shù)智標(biāo)識(shí)也在城市治理和智慧城市建設(shè)中具備重要地位。通過(guò)數(shù)智標(biāo)識(shí),城市管理者可以對(duì)城市居民進(jìn)行身份識(shí)別和信息管理,實(shí)現(xiàn)智能化的城市服務(wù)和治理。例如,通過(guò)數(shù)智標(biāo)識(shí),城市居民可以享受智能交通、智慧停車(chē)、智能 。
耐高溫涂料是高溫防腐領(lǐng)域必不可少的一種涂料,而關(guān)于“如何正確選擇耐高溫涂料”的話題似乎也是老生常談了,但隨著工業(yè)水平的不斷提高,人們的需求不斷變化,因此對(duì)于耐高溫涂料的要求也不斷變化。耐高溫涂料是指耐 。
振動(dòng)分析儀的精度和分辨率是多少?振動(dòng)分析儀是一種用于測(cè)量和分析物體振動(dòng)特性的儀器。它可以幫助我們了解物體的振動(dòng)頻率、振幅、相位等參數(shù),從而對(duì)物體的結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行評(píng)估和改進(jìn)。在使用振動(dòng)分析儀時(shí),我們經(jīng)常 。
空間布局的靈活性是室內(nèi)設(shè)計(jì)的一個(gè)重要特點(diǎn)。一個(gè)可調(diào)整和適應(yīng)變化的設(shè)計(jì)可以提供更多選擇和可能性,使人們的生活更加靈活多樣。室內(nèi)設(shè)計(jì)可以通過(guò)材料選擇和裝飾元素來(lái)提升環(huán)境的質(zhì)感和品味。高質(zhì)量的材料和精心設(shè)計(jì) 。
選擇合適的石材養(yǎng)護(hù)劑對(duì)于石材的石材養(yǎng)護(hù)非常重要。以下是選擇石材養(yǎng)護(hù)劑時(shí)應(yīng)考慮的幾個(gè)方面:石材類(lèi)型:不同類(lèi)型的石材有不同的化學(xué)和物理特性。確保選擇的石材養(yǎng)護(hù)劑與你的石材類(lèi)型兼容,以避免對(duì)石材表面造成損害 。
活性炭給料系統(tǒng)是一種廣泛應(yīng)用于水處理領(lǐng)域的設(shè)備,它的主要作用是利用活性炭的吸附性能,去除水中的各種有害物質(zhì),提高水質(zhì)凈化效果。然而,在使用過(guò)程中,活性炭給料系統(tǒng)可能會(huì)出現(xiàn)一些常見(jiàn)故障,這些故障如果得不 。
重型貨架在存儲(chǔ)和搬運(yùn)過(guò)程中,如果使用不當(dāng)或維護(hù)不及時(shí),可能會(huì)引發(fā)一些安全事故。為了防止這些事故的發(fā)生,可以采取以下措施:1. 合理設(shè)計(jì)貨架:貨架的設(shè)計(jì)應(yīng)該符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定,確保其穩(wěn)定性和承重能力。同 。
車(chē)載電子警察系統(tǒng)作為現(xiàn)代交通管理的重要工具,其準(zhǔn)確性是非常關(guān)鍵的。從技術(shù)角度來(lái)看,車(chē)載電子警察系統(tǒng)的準(zhǔn)確性主要取決于以下幾個(gè)方面。首先,設(shè)備精度對(duì)于車(chē)載電子警察系統(tǒng)來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。攝像頭、雷達(dá)等設(shè)備的精 。
噪聲通常很容易就能夠被人耳感知,但單靠人耳和眼睛很難察覺(jué)聲源主要發(fā)聲位置及頻帶特征。工業(yè)上的噪聲通常與機(jī)械故障或者機(jī)械缺陷息息相關(guān),定位出聲源主要位置、識(shí)別主要頻帶特征,能夠協(xié)助指導(dǎo)工程師快速查找故障 。
pH下降的原因有兩個(gè),一是進(jìn)水堿度不高。二是進(jìn)水碳源不足,無(wú)法補(bǔ)充硝化消耗的一半的堿度。由硝化方程式可知,隨著NH3-N被轉(zhuǎn)化成NO3—-N,會(huì)產(chǎn)生部分礦化酸度H+,這部分酸度將消耗部分堿度,每克NH 。